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Pp-EIN2基因的克隆及其在桃果实发育成熟过程中的表达分析

赵彩平  智军海  韩明玉  王安柱  刘航空  
【摘要】:以桃栽培品种"瑞蟠4号"和"瑞蟠5号"桃果实为试材,克隆Pp-EIN2基因,进行序列分析,并研究Pp-EIN2在桃花、果实、种仁发育和果实成熟软化过程中的表达量变化。结果表明:(1)Pp-EIN2基因的cDNA全长为4399bp,其开放阅读框大小为3915bp(234-4148bp)编码1304个氨基酸,推导编码的蛋白质分子量为141.44KD,等电点为5.982。(2)Pp-EIN2基因序列与其他植物的EIN2具有较高同源性,但其推导的氨基酸同源性较低65%。(3)构建了原核表达载体pET-32-EIN2,IPTG诱导显示pET-32-EIN2在宿主菌中得以表达,并且随诱导时间的延长,表达产物的含量增加。(4)在果实和种仁发育过程中Pp-EIN2基因的表达量较低,且没有表现出与发育阶段存在明显相关性,因此,Pp-EIN2基因可能在调控正常的果实和种仁发育中不起主要作用。(5)在果实成熟软化过程中,"瑞蟠4号"和"瑞蟠5号"两品种均表现出伴随着乙烯释放高峰的出现,Pp-EIN2的表达量也达到峰值,这说明Pp-EIN2在调控桃果实成熟软化过程中起关键作用。

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