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半矮生桃基因组DNA提取及SSR-PCR反应体系的优化

韩世明  王志强  牛良  鲁振华  刘淑娥  宋银花  李春奇  
【摘要】:为获得高纯度高质量的DNA和建立稳定的SSR-PCR反应体系,采用常规CTAB法和改进CTAB法提取半矮生桃基因组DNA。结果表明:改进CTAB法提取的DNA纯度高,多糖和蛋白质含量低,可用于SSR反应。同时,通过对影响SSR反应的6个要素设计正交试验,确定了最优的SSR-PCR反应体系,20μl反应体系为:5mmol/LMg2+1.5μl,2.5mM/L dNTPs2μl,5U的Taq酶0.22μl,10×Buffer缓冲液4μl,10mM引物0.6μl,20ng模板0.8μl,优化的退火温度为57.6℃。

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