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红芪多糖对db/db小鼠糖尿病心肌病NF-κB/IKKβ信号通路的影响

张花治  金智生  和彩玲  王东旭  何流  王栋  贾龙  邵晶  
【摘要】:目的:观察红芪多糖对糖尿病心肌病(DCM)db/db小鼠心肌组织NF-κB/IKKβ信号通路的影响,探讨其防治DCM的作用机制。方法:将60只7周龄的雄性db/db小鼠随机分为5组,红芪多糖200、100、50mg/kg1组、罗格列酮4mg/kg组、模型组;正常组为12只同周龄的db/m小鼠。其中正常组和模型组给予等剂量0.9%NaCl灌胃,红芪多糖各组分别给予200、100、50mg/kg剂量的红芪多糖混悬液灌胃,罗格列酮组给予4mg/kg剂量的罗格列酮混悬液灌胃,连续灌胃8周后,HE、Masson染色观察心肌组织病理改变,电镜观察心肌超微结构的变化;ELISA酶联免疫法检测心肌组织中TNF-α、IL-6的含量;qPCR、Western blot法检测心肌组织中NF-κB、IKKβmRNA和蛋白的表达,并分析NF-κB蛋白表达与TNF-α和IL-6含量的相关性。结果:HE和Masson染色结果显示:模型组小鼠心肌细胞肥大、扭曲、排列紊乱,结构不清楚,HE染色可见大量的心肌成纤维细胞增生,Masson染色可见心肌间质亮绿色胶原纤维明显增加,而各干预组较模型组均有不同程度的改善,其中以HPS高剂量组及西罗格列酮组最为显著;电镜结果显示模型组心肌细胞排列紊乱、肌丝溶解、断裂,肌丝束中Z线、A带、M线不明显,明暗带紊乱,闰盘不规则,细胞核浓缩,线粒体肿胀变性,嵴大部分出现融合及髓样化,可见糖原颗粒和脂滴的沉积。与模型组相比,各干预组的心肌细胞和线粒体损伤明显减轻,尤其以红芪多糖200mg/kg组与罗格列酮4mg/kg组改善最为显著;与正常组比较,模型组小鼠心肌组织中IL-6、TNF-α的含量显著升高(P0.01),NF-κB、IKKβmRNA和蛋白表达也明显升高(P0.01);与模型组比较,各干预组IL-6的含量、IKKβmRNA和蛋白的表达均较模型组明显降低(P0.01或P0.05),红芪多糖200、100mg/kg组及罗格列酮4mg/kg组TNF-α的含量及NF-κB mRNA和蛋白的表达显著降低(P0.01或P0.05),其中红芪多糖200mg/kg组与罗格列酮4mg/kg组作用最为显著,二者之间无统计学意义(P0.05)。NF-κB蛋白表达与IL-6、TNF-α含量均呈正相关,相关系数0.866、0.740(P0.01)。结论:红芪多糖可减轻小鼠心肌病理损害,减缓心肌胶原沉积和间质纤维化,其主要作用机制可能是通过调控NF-κB/IKKβ信号通路的表达抑制炎症反应来发挥作用。

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