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水稻纹枯病菌毒素分离纯化与组分分析

陈夕军  孟令军  童蕴慧  徐敬友  
【摘要】:以不同有机物为溶剂,均能从水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)培养滤液中萃取出毒素,但其活性有较大差异。其中乙醚萃取法和活性炭吸附加乙醚萃取法获得的毒素活性最强,对水稻胚根伸长的抑制率达90%以上;其次是活性炭吸附法,毒素抑制率为80%以上;而乙酸乙酯萃取的毒素抑制率仅为50%左右。将活性较高的四种有种溶剂萃取物经紫外扫描发现,其吸收峰均为220nm左右,说明不同有机溶剂萃取的毒素基本为相同物质,其活性大小可能主要是由于毒素在不同极性有机溶剂中溶解度不同造成的。将用乙醚分步萃取的有机相(萃取物)、水相和沉淀分别进行生物活性测定。结果表明,有机相经旋转蒸发后获得的粗毒素活性较高,对水稻胚根伸长的抑制率达96.98%,而水相和沉淀的活性很小。将乙醚萃取物针刺接种水稻叶鞘,可出现纹枯病类似症状。将乙醚萃取物进行两次Sephadex G-75硅胶柱层析,收集活性峰,经HPLC检测表明,其成分中不含苯甲酸、苯乙酸及其衍生物。通过薄层色谱分析发现,活性成分主要为糖类,其迁移率与葡萄糖、甘露糖和半乳糖相近。红外光谱检测指出,毒素中含有N-H、C-H、C=O和C-N/C-O等化学键。经气质联用检测进一步表明,毒素成分中不含苯甲酸、苯乙酸及其衍生物,而主要为糖类。至于其为何种糖?含有什么活性基团?尚待进一步研究。

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