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基因传递和表达增效策略:用微孔温敏性水凝胶装载非病毒质粒DNA复合物

胡朝华  张蕾  吴德群  程巳雪  张先正  卓仁禧  
【摘要】:通过将质粒DNA和聚乙烯亚胺(PEI)纳米复合物包裹于温敏性葡聚糖-聚己内酯-甲基丙烯酸羟乙酯-聚N-异丙基丙烯酰胺共聚物(Dex-PCL-HEMA-PNIPAAm)微孔水凝胶发展基因传递和表达增效策略。制备了一系列不同投料比的温敏性水凝胶,水凝胶网络孔径随PCL和Dex含量增高而缩小,水凝胶孔径变化范围在1~10μm。在氮磷比(PEI中的氮/DNA中的磷)为10时,枝化聚乙烯亚胺(PEI25k)和质粒DNA在水溶液中自组装形成稳定的复合物(PEI/DNA),这种DNA复合物在透射电镜下可观察到规则的球状颗粒。粒径仪分析表明DNA复合物颗粒具有较窄的尺寸分布,颗粒平均尺寸大小为173 nm。通过包裹处理,PEI/DNA纳米复合物沉积并分散在温敏性微孔水凝胶内表面。转染试验结果说明,温敏性微孔水凝胶包裹的PEI/DNA纳米复合物不仅保持较高水平的转染率,同时表现延长基因表达的效果。我们研究表明,这种结合非病毒基因纳米复合物和温敏性微孔水凝胶的转染增效策略在特定病患部位的基因治疗方面具有很大的应用潜力。

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