长效控释GDNF微囊的制备及其生物学活性的研究

【摘要】：目的制备长效控释胶质源性神经营养因子(GDNF)微囊并对其生物学特性进行测定。方法复乳溶剂挥发法制备GDNF控释微囊,采用60Co放射源对冻干微囊进行辐照灭菌。通过细菌学检查评价微囊灭菌效果,光镜、电镜对微囊的形态和分布进行评估,计算微囊的各物理性状,GDNF-ELISA测定其体外释放,细胞培养评估其生物学活性。结果制备并辐射灭菌后的微囊,培养7天无微生物生长,灭菌微囊符合无菌规定。扫描电镜下见微囊形态完整,表面光滑。测得微囊粒径大小为19.15±0.23um。GDNF控释微囊的产率为79.10%,微囊的载药量为0.175ug/mg,包裹率为69.6%。体外释放实验示GDNF控释微囊前3天释放药物总量的1/3,3天后药物的释放趋于稳定,40天内绝大多数药物从微囊相对稳定的释放出来。微囊内GDNF生物学活性的测定结果示阳性对照组中运动神经元突起的数量及长度与GDNF微囊组无明显差别(P 0.05),均优于空白对照组中运动神经元突起的数量及长度,证明了制备的GDNF控释微囊中的GDNF具有生物活性。结论采用复乳溶剂挥发法成功制备长效GDNF控释微囊,并采用60Co放射源对冻干微囊进行辐照灭菌。通过对微囊特性的研究、无菌检查和GDNF活性测定证明微囊形态良好,含有目标浓度和稳定生物学活性的GDNF,控释效果理想。