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参芪地黄汤对IgA肾病大鼠肾组织Nephrin mRNA表达水平的影响

马红珍  陈红波  庄英  何灵芝  
【摘要】:目的观察参芪地黄汤对IgA肾病大鼠肾组织Nephrin mRNA表达水平的影响,探讨参芪地黄汤防治IgA肾病的作用机理。方法清洁级雄性SD大鼠50只,体重200±20g,随机分为正常组、模型组、雷公藤多甙片组、参芪地黄汤单倍及双倍剂量组共5组,每组各10只。采用口服牛血清白蛋白(BSA)、腹部皮下注射四氯化碳(CCl4)及尾静脉注射脂多糖(LSP)复合方法制作IgA肾病模型大鼠。参芪地黄汤由党参、黄芪、地黄、山药、萸肉、茯苓组成(江苏省江阴市天江药业有限公司提供的中药颗粒剂),给药剂量以成人剂量(kg/d)的6.25倍为单倍剂量,成人剂量(kg/d)的12.5倍为双倍剂量。雷公藤多甙片由浙江普洛康裕天然药物有限公司生产(批号:100701),大鼠给药剂量为成人剂量1mg/(kgd)的6.25倍。三个药物干预组在造模同时隔日灌胃给药,正常组与模型组予同等量生理盐水灌胃,持续12周。实验末观察24小时尿蛋白定量(24h-Upro)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血清白蛋白(Alb),免疫荧光和HE染色观察肾组织病理改变,RT-PCR检测肾组织Nephrin mRNA表达水平。结果 (1)模型组大鼠肾小球系膜区可见分枝状或颗粒状IgA中度沉积,荧光强度为(+~++)。正常组大鼠肾小球系膜区无或微弱的IgA沉积,荧光强度为(-)。正常组与模型组比较有统计学意义(P﹤0.05),表明IgA肾病大鼠模型复制成功。(2)第9周末开始,模型组、雷公藤多甙片组、参芪地黄汤单倍剂量及双倍剂量组出现明显蛋白尿,与正常组比较有统计学差异(P﹤0.05);三个药物干预组24h尿蛋白定量低于模型组(P﹤0.05);三个药物干预组比较无显著差异(P﹥0.05)。(3)第12周末各组实验大鼠间血肌酐、血尿素氮及血清白蛋白比较均无统计学意义(P﹥0.05)。(4)光镜下模型组见肾小球弥漫轻中度系膜增生,可见部分毛细血管襻受压,管腔狭小及球囊粘连。三个药物干预组肾小球系膜基质增多程度较模型组轻,系膜细胞增生较模型组少。(5)免疫荧光显示模型组肾小球系膜区IgA呈分枝状或颗粒状中度沉积,其余各组系膜区IgA沉积明显减弱(P﹤0.05)。(6)RT-PCR结果显示:与正常组比较,各个造模组Nephrin mRNA相对表达量明显下降(P﹤0.05),三组药物干预组Nephrin mRNA表达高于模型组(P﹤0.05),但三个药物干预组比较无明显统计学差异(P﹥0.05)。结论 1.参芪地黄汤有降低IgA肾病大鼠24h尿蛋白的作用。2.参芪地黄汤可上调IgA肾病大鼠肾组织Nephrin mRNA的表达。3.参芪地黄汤具有防治IgA肾病大鼠肾组织损害的作用。其机制可能是减少IgA在肾组织的沉积,并通过上调肾组织Nephrin mRNA的表达以稳定肾小球裂孔隔膜,保护肾小球滤过屏障,减少尿蛋白,从而延缓肾脏损害。

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