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CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞对肝星状细胞增殖及功能的影响

陈永平  程瑗  金晓芝  欧阳韬  王春莹  刘俊  郑明华  
【摘要】:目的研究CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)在体外对肝星状细胞增殖以及功能的影响,初步探讨CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞促肝纤维化的机制。方法传代培养人肝星状细胞株(hepatic stellate cell,HSC)LX-2,将MASC法分离得慢乙肝病人CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞与HSC LX-2按不同方式共培养5天,以单独培养的HSC为对照组,CCK-8法检测共培养HSC增殖情况,ELISA法检测上清液中TGFβ1含量,放射免疫法检测HSC分泌HA、PCⅢ情况。应用单因素方差分析进行统计学分析。结果 5例Treg与HSC比例为1.5:1时HSC增殖最为明显,10例直接接触共培养与使用Transwell系统非直接接触共培养Treg与HSC时吸光度值分别为(0.713±0.032)、(0.735±0.028)cpm均较对照组单独培养HSC吸光度值(0.677±0.029)cpm增殖明显(t=5.4003,8.7878;均P0.01)。10例直接接触共培养与非直接接触共培养组细胞上清液中TGFβ1浓度分别为(781.59±76.45)、(81 3.53±60.62)pg/ml,显著高于对照组的(722.51±59.66)pg/ml(t=4.0014,6.1653;均P0.01);HA浓度分别为(433.57±27.90)、(445.40±23.73)ng/ml,显著高于对照组的(415.83±19.44)ng/ml(t=3.3124,5.5231;均P0.01);PCⅢ浓度分别为(21.93±1.71)和(23.12±1.87)ng/ml,显著高于对照组的(20.10±1.49)ng/ml(t=4.8082,7.9436;均P0.01)。且非直接接触组各项结果均显著高于直接接触组(t=3.3875,2.1639,2.2107,3.1354;均P0.05)。结论 CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞可通过分泌TGFβ1,促进共培养的肝星状细胞增殖以及分泌更多的HA、PCⅢ。体外实验证明CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞具有促进肝纤维化的重要作用。

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