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ARMS法检测肠癌、肺癌患者K-ras、EGFR基因突变的可行性研究

李焕铮  毛义建  唐少华  蒋义  
【摘要】:目的采用ARMS法和直接测序法平行检测结直肠癌患者K-ras基因和肺癌患者EGFR基因,比较两种方法的检测结果 ,分析ARMS法用于肿瘤患者K-ras和EGFR基因体细胞突变检测的临床价值。方法收集临床肿瘤样品27例,其中肠癌样品12例(石蜡包埋切片组织11例、新鲜组织1例),肺癌样品15例(石蜡包埋切片组织10例、穿刺标本3例、恶性胸水2例)。采用直接测序法检测肠癌样本K-ras基因第2、3、4、5外显子和肺癌样本EGFR第18、19、20、21外显子的突变状态,同时采用ARMS法(ADx-K-ras、ADx-EGFR)检测K-ras基因第12、13密码子7种常见突变位点和EGFR基因第18、19、20、21外显子的29种常见突变位点。将ARMS法和直接测序法的检测结果进行对照和分析。结果直接测序法成功检测了24例标本,成功率为88.88%;ARMS法对27例样本检测均有明确的结果 ,成功率为100%。12例肠癌标本,直接测序法成功检测11例标本,未发现突变;ADx-K-ras试剂盒检出突变2例(GGTGTT、GGTCGT)。15例肺癌标本,直接测序法成功检测13例标本,均未发现突变;ADx-EGFR试剂盒成功检测15例标本,检出突变2例,1例为G719A突变,1例携带双突变(19-del、G719S/G719C)。同时ARMS方法检测时间较直接测序法短,且结果判读直观,更易检出肿瘤丰度较低的突变。结论 ARMS法对样本中DNA质量的耐受性较好,检测成功率高于直接测序法,可望替代直接测序法成为临床上对肿瘤K-ras和EGFR基因突变检测的实用方法 。

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