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TNF-α、NF-κB与明胶酶在病毒性心肌炎中的相关研究

阮妙华  陈其  张园海  
【摘要】:目的初步研究TNF-α/NF-κB/MMP-2,9在病毒性心肌炎中的表达,为上述路径的进一步研究做准备。方法 40只清洁级近交系6周龄雄性BALB/c小鼠随机分为2组:心肌炎组(V组)30只(腹腔注射CVB3病毒),实验对照组(C组)10只。于病毒接种后第4 d、10 d分别采血后处死小鼠并留取心脏标本。采用免疫组化法和ELISA检测心肌明胶酶和NF-κB蛋白表达,以及血清TNF-α的浓度。结果 1.心肌炎组心肌出现明显的炎症细胞浸润,伴有间质水肿,血管充血,心肌肿胀坏死,甚至出现钙化灶阴性对照组中心肌细胞形态及结构正常,未见炎性细胞浸润和心肌细胞死亡。2.心肌组织MMP-2蛋白平均吸光度(mean optical density,MOD)比较:对照组和感染第4天主要在血管内皮细胞中呈弱表达,在正常心肌细胞中无表达;而心肌炎组在感染第10天,在局部坏死灶及其周围以及结构正常的心肌细胞上呈阳性表达,心肌炎组的MOD值显著高于对照组(P0.05)。3.心肌组织MMP-9蛋白MOD值比较:对照组和感染第4天,对照组中为阴性表达;而心肌炎组感染第10天,在局部坏死组织以及炎性细胞中呈弱表达,与免疫炎性细胞浸润相关,在正常心肌组织中不表达(P0.05)。4.心肌组织NF-κB蛋白MOD值比较:对照组和感染第4天,对照组中为阴性表达;而心肌炎组感染第10天,在局部坏死组织以及周围正常的心肌细胞核中可见阳性表达(P0.05)。5.心肌炎组感染第4天血清TNF-α的含量开始升高,感染第10天显著升高,均明显高于对照组(P0.05)。6.小鼠心肌炎症病理积分与MMP-2免疫组化阳性表达的平均吸光度呈显著正相关(r=0.767,P0.05,N=8);小鼠心肌炎症病理积分与MMP-9免疫组化阳性表达的平均吸光度呈显著正相关(r=0.767,p0.05,N=8)。结论 1.TNF-α,NF-κB,MMP-2和MMP-9在CVB3诱导的小鼠病毒性心肌炎的急性期表达上调,参与了CVB3诱导的小鼠病毒性心肌炎的病理生理过程。2.明胶酶过度激活参与心肌炎病理改变,可能为导致间质改变、炎性细胞浸润关键因素,可用来判断心肌间质炎性细胞浸润及心肌间质损害的程度。

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