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大鼠缺氧缺血性脑损伤后海马P13K/Akt信号通路及PTEN的分布与表达

姚丹  何雪  江克文  赵正言  
【摘要】:目的探讨缺氧缺血条件下海马区三磷酸肌醇激酶(phosphoinositid 3-kinase/Akt,PI3K/Akt)信号通路的激活及PTEN的表达,推测PI3K/Akt信号通路与PTEN表达调节的关系,以期更确切地阐明PI3K/Akt信号通路在发育期脑缺氧缺血性损伤(hypoxia ischemia brain damage,HIBD)后的作用。方法 7日龄SD大鼠110只,随机分为正常对照组(n=39)、假手术组(n=39)、实验组(n=32)。参照Rice法,并采用Nakajima等改良的动脉结扎法制作新生大鼠HIBD动物模型。假手术组只游离而不结扎剪断左侧颈总动脉,不予缺氧处理。正常对照组不作任何处理。于建模后4h处死动物取脑组织应用免疫荧光法检测AKT、PTEN蛋白的分布和表达;分别于建模后1、4、12及24 h处死动物取脑组织,应用Western blot检测AKT、p-Akt及p-PTEN蛋白的含量。结果脑缺氧缺血损伤后早期p-Akt和p-PTEN都有不同程度的表达增加,但不同步,其中p-Akt高峰较早,在4h,而p-PTEN的高峰稍延迟,在12小时,与假手术组表达的比较均有差异。假手术组各时间点p-Akt和p-PTEN均有极少量弱阳性表达。HIBD模型组p-Akt蛋白表达在4h和12h时间点明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05);p-PTEN蛋白表达于4h,12h和24h明显高于假手术组,差异有统计学意义(P0.05)。AKT蛋白表达随术后时间的延长无明显变化,与假手术组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论发育期大脑HIBD后早期可激活PI3K/Akt信号通路,p-Akt表达增高,但同时PTEN也被激活,从而抑制了p-Akt的表达,最终导致神经元的损伤。期望能针对PI3K/Akt信号通路和PTEN寻找到防治新生儿HIBD的更好方法,为开发出以AKT/PTEN为靶点的神经保护剂治疗缺氧缺血脑病提供了理论依据。

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