新生大鼠少突胶质前体细胞的培养和分离纯化

【摘要】：目的在体外培养条件下探索少突胶质细胞生长条件及分离方法,获得较高纯度的少突胶质前体细胞。方法取新生大鼠大脑原代混合胶质细胞培养7～10 d,利用振荡分离及差速贴壁法纯化少突胶质前体细胞,再用添加了N2 supplement、血小板衍生生长因子(PDGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的无血清培养基进行培养。用免疫荧光法对细胞表面抗原进行鉴定。结果原代培养48h后细胞出现分层,02A祖细胞(oligodeedrocyte-type 2 astreo-eprogenitor)分散位于星形胶质细胞单层上。混合胶质细胞培养时细胞完全分层的出现是振荡分离0A祖细胞的适宜条件。分离纯化的02A祖细胞经无血清化学条件培养基培养后分化为少突胶质细胞。其他胶质细胞不再生长。结论本实验建立的少突胶质细胞培养方法,可获得纯化的少突胶质细胞,能满足进一步的实验需要,为阐明早产儿PVL发病机制提供丰富的实验资源。