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激光扫描共聚焦显微镜观察大鼠局灶性脑缺血半暗区内小胶质细胞的变化及意义

韩书珍  李雪梅  牛文泽  陈翔  王果  李泽宜  
【摘要】:目的探讨用激光扫描共聚焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscope,CLSM)观察局灶性大鼠脑缺血半暗区内小胶质细胞的变化及意义。方法采用改良线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注损伤模型。动物随机分为假手术组(S)、模型组(M)。M组按再灌注时间不同又分为再灌注6h组、24h组、48h组、72h组、7d组。在制作MCAO模型时和制作后的12h尾静脉各注射一次罗丹明6G(Rhod6G)。各组动物麻醉清醒后及处死前均给予神经行为学评分,观察至规定的时间心脏灌注固定后凝集素荧光(FITC-ILB4)组化染色法CLSM观察浸润的单核细胞及脑内小胶质细胞的变化情况。结果与S组比较,M组半暗区ILB4+细胞数均明显高于S组,差异有高度显著性(P0.01);M组内比较,7d组、72h组、48h组半暗区ILB4+细胞数明显高于6h组、24h组,差异有高度显著性(P0.01);半暗区内固有小胶质细胞与浸润细胞计数的比值进行比较,72h组较6h组比值明显增高,有高度显著性差异(P0.01);72h组较24h组比值增高,有显著性差异(P0.05)。梗死灶内固有小胶质细胞与浸润细胞计数的比值进行比较,72h组较6h、24h组比值增高,有显著性差异(P0.05)。结论缺血后大脑实质内一部分小胶质细胞来源于循环中的单核细胞;迁移的小胶质细胞主要聚集于半暗区,数量在72h达到高峰,形态以阿米巴样为主,推断半暗区小胶质细胞的变化与脑缺血后的神经修复作用相关。

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