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β-七叶皂苷诱导HL-60细胞调亡的研究

成志  高瑞兰  陈小红  金锦梅  
【摘要】:目的:观察不同浓度的β-七叶皂苷(从天师栗果实提取的主要活性成分)是否具有诱导髓性白血病 HL=60的细胞株的凋亡作用。方法:HL-60细胞悬浮生长于含10%胎牛血清的 RFMI1640 培养液中培养,取对数期生长的细胞做饥饿处理后,给予终浓度为0、15、30、45和60mg/L 的β- 七叶皂苷注射液处理24小时后,观察七叶皂苷所致的细胞生长抑制率变化;形态学的变化;并进行 DNA 片段分析(DNALadder);用 Annexin V-FITC 试验法分析细胞凋亡百分率。结果:1.七叶皂苷能够抑制 HL=60细胞生长。2.在一定剂量和时间范围内可引起细胞凋亡,镜下可见明显的核固缩, 碎裂成大小不等的核物质,细胞膜包裹裂解的细胞核等细胞凋亡形态。3.DNA 片段分析出现典形的 DNA 梯形带(DNA Ladder)。提示七叶皂苷可使细胞内源性核酸酶活性增高,将核小体之间的 DNA 切割成180-200bp 的多聚体。4.Annexin V-FITC 分析结果也表明,给药组与空白对照组引起细胞凋亡有明显的统计学差异,其中45mg/L 诱导细胞凋亡率最高,浓度再上升,则细胞凋亡率下降,死亡率上升。结论:提示β-七叶皂苷能特异性地诱导 HL=60细胞凋亡,可为临床应用β-七叶皂苷作为化疗药物的辅助剂治疗白血病提供实验依据。

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