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K562/MDR细胞与树突状细胞融合诱导P170蛋白特异的CTL应答

盛立霞  
【摘要】:目的:研究通过细胞融合方法将 P170抗原负载树突状细胞(DC)能否有效诱导 P170蛋白特异的 CTL 应答。方法:通过贴壁黏附获得外周血单核细胞,用 GM-CSF+IL-4诱导培养 DC,并以 TNF-α促进 DC 成熟,于第7天收获 DC,分3组:Ⅰ组与 K562/MDR 细胞融合以负载 P170抗原;Ⅱ组与 K562/MDR 细胞共培养;Ⅲ组为单独 DC。通过流式细胞仪(FCM)检测 PE-P170/FITC-HLA-ABC Ab 双标细胞来评估融合率。将三组细胞分别与 T 细胞共同孵育5天,MTT 法检测比较各组 T 细胞对 P170+靶细胞 K562/DMR 及 HL60/VCR 的杀伤活性。结果:我们采用40%PEG-10%DMSO 诱导的 DC 与 K562/MDR 细胞的融合效率为(22.39±2.55)%,融合细胞同时表达 DC 的表型和 P170分子,能激活 T 淋巴细胞显示出对 P170+靶细胞产生抗原特异细胞毒作用。结论:K562/MDR 与树突状细胞融合能够诱导 P170蛋白特异的 CTL 应答, 可用于多药耐药白血病的免疫治疗.

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