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PS341联合阿霉素诱导Jurkat细胞凋亡的实验研究

陈均法  金洁  
【摘要】:本研究旨在探讨蛋白酶抑制剂(硼替佐米,PS341)对 Jurkat 细胞的凋亡诱导作用及其可能机制,同时观察联合 PS341与阿霉素对 Jurkat 细胞有无协同作用。采用 MTT 比色法检测 PS341、阿霉素对 Jurkat 细胞株的体外生长的抑制作用,油镜下观察细胞形态;DNA 的 PI 染色及 AnnexinV-PI 双标记法检测细胞凋亡率;western-blot 法检测 PS341、阿霉素对 Jurkat 细胞 Caspase3,Caspase 8和 PARP 蛋白表达水平的影响。结果显示:10~320 ng/ml PS341处理 Jurkat 细胞24h、48h、72h,均能明显抑制细胞增殖,且生长抑制率与药物作用浓度呈正相关(P0.01),呈浓度依赖性,以10~320 ng/ml PS341单药或联合低剂量阿霉素(125 ng/ml)处理 Jurkat 细胞24h,PS341的 IC50从137.64ng/ml 降为20.44ng/ml, 两组差异显著(P0.01):细胞凋亡率与 PS341作用浓度呈正相关(P0.01),PS341 40ng/ml+ 阿霉素125ng/ml 组与 PS341 160ng/ml 单药组细胞凋亡率无明显差异(P0.05)。PS341 作用 Jurkat 细胞后 Caspase8,Caspase3和 PARP 蛋白出现明显的剪切带。结论:PS341具有诱导 Jurkat 细胞凋亡作用。通过外源性途径诱导凋亡是其机制之一;PS341与阿霉素联合能增强 Jurkat 细胞对 PS-341的敏感性,有一定的协同作用。

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