大鼠曲细精管生殖细胞共培养和精子发生过程的观察

【摘要】：哺乳动物精子发生过程是生殖细胞在曲细精管内发育的复杂过程,该过程包括 A 型精原干细胞的自我更新,A 型精原干细胞经减数分裂产生圆形精子(经过 B 型精原干细胞和精母细胞), 和减数分裂后的精子形成过程。该精子发生过程不仅被促性腺激素(FSH 或 LH)所调节,同时也被精原细胞和支持细胞之间的相互作用所影响。为了开展生精细胞与睾丸支持细胞之间相互作用的研究,我们进行了大鼠睾丸生殖细胞的原代共培养。原代生殖细胞和支持细胞由8天龄大鼠睾丸曲细精管组织块产生.在我们设立的培养系统中,生精细胞和支持细胞在不外加生长因子的条件下共生达六个月以上.这意味着精原干细胞在这段培养时间里维持着不断的更新和分化,组织块和共生的支持细胞为生殖细胞的增生和分化提供了营养因子和调节因子. 在共培养期间,可观察到从曲细精管中游出的支持细胞贴壁生长,生殖细胞或贴壁生长,或在贴壁细胞表面运动.精原干细胞因为其数量较少很难观察到.精母细胞较易看到,有的贴壁生长(较暗),有的游离在贴壁细胞表面(较亮),其形态特点是边缘有突起,突起物可收缩运动而带动细胞运动.圆形精子细胞数量最多,最易观察到.游离的精子细胞在不停的转动,可发生位移,能看到波动和跳动,其形态特点是有鞭毛,鞭毛可作波形摆动.也可观察到长形精子细胞,其细胞拉长, 细胞核位于一侧,另一侧变得较细较长,呈鞭毛状。在我们的培养系统中还观察到了同源群现象. 大鼠曲细精管生殖细胞的长期培养技术将有助于研究精子发生机制,为体外研究生精细胞与支持细胞的相互作用建立了细胞模型。