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阿司匹林抑制TNF-α诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞NF-κB活化且增强其凋亡

朱桂英  樊树强  高玲  蔡景龙  
【摘要】:目的:探讨阿司匹林对肿瘤坏死因子因子(TNF-α)诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞 NF-κB信号传导通路活化的影响以及对 TNF-α诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响。方法:原代培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,细胞分为空白对照组、50ng/mlTNF-α处理组、1.0mM、2.5 mM、5.0mM 以及10.0 mM 阿司匹林预作用2h 后 TNF-α再处理组,作用时间为15min,抽提细胞浆与细胞核蛋白。应用 Westem Blot 技术检测细胞浆 IκB-α蛋白表达水平,TransAM~(TM) NF-κB p65 Kit 试剂盒检测细胞核 NF-κB p65 DNA 结合活性水平.作用时间为1h,利用免疫荧光技术观察 NF-κB P65及其上游抑制因子 IκB-α亚细胞分布。1.0mM、5.0mM、10.0mM 阿司匹林预作用细胞2h 后 TNF-α再处理24h,应用流式细胞仪检测不同处理组瘢痕疙瘩成纤维细胞的凋亡率。结果:TNF-α刺激瘢痕疙瘩成纤维细胞导致细胞浆 IκB-α蛋白水平降低,NF-κB P65从细胞浆转移至细胞棱,NF-κB p65 DNA 结合活性水平增高; 阿司匹林可以阻止细胞浆 IκB-α的降解,从而抑制 NF-κB P65的细胞核移位以及 NF-κB p65 DNA 结合活性水平的增高.同时,阿司匹林可以促敏瘢痕疙瘩成纤维细胞对 TNF-α诱导的凋亡,其作用强度呈剂量依赖性.结论:阿司匹林可以有效阻止 TNF-α诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞 NF-κB信号通路的活化,增强 TNF-α诱导的凋亡,研究结果显示阿司匹林有望成为以 TNF-α干预作用为基础的治疗瘢痕疙瘩的临床手段。

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