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耐利福平结核杆菌rpoB基因突变研究中所发现的几种新的突变型

杜蓬  李峰  董兆麟  陈超  
【摘要】:96%以上的耐利福平结核杆菌临床分离株中都有rpoB基因发生突变。本研究采用PCR-SSCP 技术对32株耐利福平结核杆菌临床分离株和10株利福平敏感株的rpoB基因157bp高频突变区 (Ala500至Val550区域)进行分析,随后对8株SSCP结果具有代表性的菌株的PCR扩增片段进行DNA 测序分析。结果发现在1株耐利福平结核杆菌菌株rpoB基因526位密码子上存在新的双位点突变型 CAC→AGC(His→Ser)。1株测序结果显示存在突变位点的耐利福平结核杆菌菌株出现假阴性的SSCP 结果。此外,两株利福平敏感株出现PCR-SSCP假阳性,其rpoB基因中存在2-3个突变位点(涉及 Leu511、Asp516和Asn518位点),其中518位密码子的突变型AAC→GAC(Asn→Asp)也为首次报道。研究结果表明,结合DNA测序等准确率高的技术,可有效避免PCR-SSCP中出现的假阳性或假阴性现象, 同时为新基因型的发现也提供了可能。

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