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脐橙基因组DNA文库的构建

张上隆  
【摘要】:研究构建了一个脐橙基因组DNA文库。以‘大山岛’脐橙幼叶为试材,CTAB法制备基因组DNA,经CSCl密度梯度离心纯化,获得了大片段(100 kb)高纯度基因组DNA。以Sau3A Ⅰ部分酶切,酶切片段3’凹端不完全补平后与LambdaGEM-12 XhoI Half-SiteArms 连接,连接产物用Packagene Extract包装,所得噬菌体在KW251寄主上铺平板。文库经过扩增并保存。对该文库特性研究表明,该文库包含了2.15×106个单个克隆,背景低于100 pfu/μg DNA,插入片段平均大小约为17 kb,证明是一个较为完整的脐橙基因组DNA文库。

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