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甜橙β-胡萝卜素羟化酶cDNA克隆及其瞬间反义表达

张上隆  
【摘要】:根据已报道的温州蜜柑(Citrus unshiu)β-胡萝卜素羟化酶(BCH)cDNA序列 (AF296158),设计一对引物,以华盛顿脐橙(C.sinensis)成熟果实cDNA为模板,采用PCR 扩增出一条长为1057 bp的cDNA片段,将此片段克隆入pUCm-T载体,测序结果表明所得序列与已报道序列同源99.62%,表明所获得的基因是BCH基因。将该基因反义插入到 pBI121中构建成反义植物表达载体,其正确性得到测序的鉴定。含有该植物表达载体的根癌农杆菌(Agrobacterium tume faciens)在脐橙白皮层中诱导了β-胡萝卜素积累。

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