三氧化二砷与粉防己碱联合作用诱导MCF-7细胞凋亡的作用

【摘要】：目的研究三氧化二砷与粉防己碱联合作用诱导MCF-7细胞凋亡的作用。方法将人乳腺癌细胞系MCF-7细胞于对数生长期,调整细胞适当浓度接种于96孔培养板,置于37℃、5%CO_2培养箱内培养24h,细胞贴壁后,更换培养液,对照组加入新鲜培养液,实验组分别加入以下药物浓度培养液:甲实验选择粉防己碱0.5ug/ml,1ug/ml,2ug/ml,4ug/ml,8ug/ml五个浓度,三氧化二砷0.375ug/mL,0.75ug/mL两个浓度单独与联合用药。乙实验选择三氧化二砷0.0469ug/mL,0.0937ug/mL,0.1875ug/mL,0.375ug/mL,0.75ug/mL五个浓度,粉防己碱2.5ug/mL和3ug/mL两个浓度单独与联合用药。继续培养,72h时用MTT法检测、并用双标法检测细胞凋亡、扫描电镜观察细胞形态,最后对收集资料进行统计学处理。结果两药单独作用时,药物组的细胞生长抑制率明显高于对照组,且随药物浓度增加抑制率增高。在甲实验中,三氧化二砷与粉防己碱联合作用时抑制率高于单独使用粉防己碱时的抑制率,且随着联合三氧化二砷浓度的增加而抑制率增高。在乙实验中,粉防己碱与三氧化二砷联合使用时抑制率高于单独使用三氧化二砷时的抑制率,且随着联合粉防己碱浓度的增加而抑制率增高;双标法检测凋亡实验结果显示药物组与对照组相比,早期凋亡率明显高于对照组,且联合用药高于单独用药(P0.01)。扫描电镜观察示:对照组乳腺癌细胞表面微绒毛丰富,伪足较多且粗壮,细胞完整,呈葵花状。三氧化二砷和粉防己碱的单独用药组和对照组相比,细胞表面微绒毛和伪足减少,伪足较短或断裂散在细胞周围,细胞较小。联合用药组细胞表面微绒毛和伪足消失,细胞更小,细胞表面出现塌陷,产生类似空洞的结构,部分细胞死亡。结论从MTT实验结果、细胞凋亡检测、形态学上均显示三氧化二砷和粉防己碱的联合作用效果优于单药作用,在一定浓度范围内有协同作用。