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Survivin shRNA载体构建及靶向下调PC3 mRNA表达实验研究

徐建华  何敏  黄宪章  柯培锋  林莲英  黎美贤  庄俊华  
【摘要】:正目的构建靶向survivin的shRNA重组质粒表达载体,转染前列腺癌细胞PC3,验证该载体能否下调survivin基因的mRNA水平。方法以Survivin基因为靶点设计具有短发夹结构的shRNA序列,经退火成互补双链后克隆入pENTR/U6建立重组表达载体(pENTR/U6-SUR);转化E.coli TOP10菌株,挑取阳性菌落进行菌落PCR和测序鉴定;将重组质粒转染前列腺癌细胞株PC3,提取RNA,RT-PCR检测重组质粒在mRNA

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