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人SNCA基因过表达慢病毒载体构建及稳定转染293T细胞系的建立

沈原  赵永波  
【摘要】:正目的构建人SNCA基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人SNCA基因的293T的细胞系。方法应用PCR技术扩增人SNCA目的基因,并将扩增产物插入慢病毒载体质粒pGC-FU上,并对阳性克隆进行基因测序鉴定。pGC-FU-SNCA-GFP重组质粒包装293T细胞,转染24小时后,用荧光显微镜观察标签GFP绿色荧光蛋白的表达,并用west blotting法测定目的基因在稳定转染293T细胞中的表达。

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