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低剂量长波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞适应性反应中ROS的变化观察

刘仲荣  杨慧兰  
【摘要】:目的观察低剂量长波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞适应性反应中ROS的变化,探讨其作用及机制。方法以86.4J/cm~2 UVA照射经7.2J/cm~2低剂量UVA单次或多次预照射的培养人皮肤成纤维细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察线粒体特异性荧光染料(MitoTracker Red CMX Ros)及其还原型的荧光探针(MitoTracker Red CM-H2X Ros)染色后各组细胞内荧光强度的变化,检测不同累积剂量的低剂量UVA照射后成纤维细胞内ROS的变化。结果在MitoTracker Red CM-H2X Ros染色120min的6个时相点,各假照射组细胞内荧光强度均无明显变化,高剂量组的成纤维细胞内荧光强度则在5min时分迅速升高至116±16.2,并在其后相内仍缓慢持续升高,而低剂量UVA照射的各组细胞内荧光强度均出现不同程度的低水平升高,其升高的程度呈累积剂量依赖;在高剂量照射后,各适应性反应组细胞荧光强度升高的时间均出现不同程度延迟,其延迟时间也呈累积剂量依赖。统计学分析显示,照射后各时相点高剂量组荧光强度与假照射组均有极显著差异(P0.001),各适应性反应组与高剂量组有显著差异(P0.01或0.05),而低剂量UVA照射引起细胞内ROS的低水平升高与假照射组比较亦有显著差异(P0.01或0.05)。结论低剂量UVA照射诱导的细胞内ROS持续低水平的升高可能是其诱导适应性反应的启动机制,一方面通过调节细胞内钙离子浓度通过信号转导诱导细胞的适应性反应,另一方面,通过产生mtDNA损害维持细胞内ROS的持续低水平升高状态使这种适应性反应持续存在。

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