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结缔组织生长因子诱导瘢痕成纤维细胞增殖的信号转导机制研究

戴霞  刘剑毅  李喆  李世荣  
【摘要】:目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)诱导增生性瘢痕(hypertrophicscar,HS)成纤维细胞增殖的信号转导通路。方法采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法观察不同浓度CTGF促HS成纤维细胞增殖的效应,以Westernβlot法检测CTGF刺激HS成纤维细胞0、5、10、15、30、60 min后磷酸化及非磷酸化细胞外信号调节激酶(extracellular-signal regulated protein kinase,ERK1/2)的表达,以二者的比值AI衡量信号通路活化程度;应用特异性阻断剂PD98059阻断ERK通路,MTT法检测CTGF诱导细胞增殖的变化。结果 CTGF在一定浓度范围内呈浓度依赖性促HS成纤维细胞增殖,ERK1/2在无CTGF刺激时AI为0.0131±0.00361,CTGF刺激HS成纤维细胞5、10、15、30、60 min后的AI值分别为0.0221±0.00329,0.131±0.0361,0.209±0.0201,0.171±0.0379,0.0413±0.00361,在15min达高峰;采用PD98059选择性阻断ERK1/2通路后(OD值=0.42±0.046)与CTGF刺激组比较(OD=0.66±0.035),细胞增殖显著受抑(P0.01)。结论 ERK 1/2是CTGF诱导HS成纤维细胞增殖的主要信号通路。

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