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Smad7siRNA对食管鳞癌细胞株EC-1增殖及侵袭的影响

王丰  李珊珊  张红燕  
【摘要】:Smad7对TGF-β信号转导发挥负性调控,Smad7表达异常与多种肿瘤发生关系密切,我们课题组前期实验证实在食管鳞癌中存在Smad7高表达。为进一步探讨Smad7对食管鳞癌浸润和转移的影响,本实验采用RNAi技术使食管鳞癌细胞株EC-1中Smad7基因沉默,采用RT-PCR、Western-blot法检测EC-1转染Smad7siRNA后24h、48h、72h Smad7、TβRⅡ、Smad3 mRNA及蛋白的表达。采用MTT法及Boyden chamber体外侵袭实验检测EC-1转染Smad7 siRNA后24h、48h、72h细胞增殖能力及体外侵袭力改变。RT-PCR及Western-blot结果显示,各时间段(24h、48h、72h)Smad7siRNA转染组Smad7mRNA及Smad7蛋白的表达均显著低于各对照组(P0.05),并随时间延长逐渐降低(P0.05)。TβRⅡmRNA、TβRⅡ蛋白及Smad3 mRNA、Smad3蛋白的表达与各对照组相比明显升高(P0.05)。MTT结果显示,转染48h、72h后Smad7siRNA组A值与各对照组相比均有显著性差异(P0.05)。Boyden chamber体外侵袭实验结果显示,24h、48h、72h、Smad7siRNA转染组与各对照组相比,穿越Matrigel胶的细胞数均明显减少(P0.05)。食管鳞癌细胞株EC-1转染Smad7 siRNA后,细胞增殖受到抑制,细胞体外侵袭能力降低。并且TβRⅡ、Smad3的表达上调。提示Smad7高表达与食管鳞癌浸润转移关系密切。

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