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三种检测鼠疫F1抗原方法比较

热娜.吐尔地  唐建国  丁厷杰  雷刚  徐秉臣  
【摘要】:目的我国鼠疫自然疫源地分布广,不断发现新的疫源地,疫源地的面积逐渐扩大;动物间鼠疫疫情持续不断,人间鼠疫时有发生,需要敏感、特异、快速的诊断与监测技术。酶联免疫吸附试验(ELISA)、反向间接血凝试验(RIHA)、胶体金纸上层析试验(GICA)三种检测鼠疫F1抗原方法,都列入中华人民共和国卫生行业标准WS279—2008。本文比较三种检测鼠疫F1抗原方法用于早期快速诊断鼠疫的效果。方法鼠疫监测工作现场采集的标本,严格按照生物安全要求采集标本,臟器组织剪碎研磨成糊状,加2倍量含0.2%升汞的0.9%氯化钠液,混匀半小时后,联上清液检验。同时用三种方法检测鼠疫F1抗原,并进行统计分析。接试剂盒使用说明操作。ELISA检测鼠疫F1抗原试剂盒:由新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心研制。鼠疫反向间接血凝试剂盒:由中国疾病预防控制中心鼠疫布氏菌病防治基地提供。胶体金检测鼠疫F1抗原试纸条:由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所与北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司联合研制。结果1.检测多种动物脏器浸液标本414份,结果见表1和表2。2.受标本腐败的影响,RIHA初试出现2孔以上凝集的186份,复试判定阳性标本18份,非特异性凝集出现率高,导至复试工作量大。GICA阳性++、ELISA阳性滴度1:2~4的2份标本,RIHA非特异性凝集为1:2~5,抑制试验阳性结果未能被显示,而被判定为阴性结果。3.ELISA与GICA检出阳性标本均为22份,ELISA与GICA阳性检出率高于RIHA,但不显著(u=1.49 u1.96 P0.05)。阳性标本的平均滴度,ELISA为2~(9.95),RIHA为2~(8.68),差异显著(t=4.379 t2.831 P0.01)。4.鼠疫F1抗原的含量较低或过高,GICA都会出现较浅的显色;相同的GICA显色深度,ELISA、RIHA的反应滴度在较大的范围分布,显色深度不表示鼠疫F1抗原含量。结论ELISA、RIHA、GICA三种方法检测鼠疫F1抗原均可用于鼠疫的早期快速诊断,同步用二种方法检验,可提高诊断的准确性。

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