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CMV启动子调控的VEGF-shRNA表达载体的构建及有效干扰序列的筛选

刘晓艳  方红  
【摘要】:正目的:构建针对人VEGF基因的小干扰RNA(siRNA)的表达载体,实现CMV启动子调控,转染肿瘤细胞后观察其对VEGF基因的干扰作用,并筛选出有效的VEGF-shRNA。方法:设计三对VEGF靶向的发夹状siRNA,依据设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入质粒pDC311-SV40-RC中,转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹转染人骨肉瘤细胞U20S,分别培养3d和7d后收集细胞培养液上清,

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