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生物素-链霉亲和素技术检测肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶方法的建立及临床应用

王念跃  赵伟  刘晨  张永臣  端木浩  
【摘要】:目的应用抗人肝癌组织中蔓陀罗凝集素(DSA)强结合的γ-谷氨酰转移酶(GGT)单克隆抗体(McAb),建立其生物素-链霉亲和素ELISA检测方法。方法应用protein G-Sepharose亲和色谱柱纯化McAb,纯化的McAb经生物素标记后建立检测DSA-GGT的生物素-链霉亲和素ELISA方法,并进行初步临床应用。结果5株交瘤细胞株收获5份腹水,经纯化后蛋白总量在2.12~6.70mg之间;生物素标记率为48.58~70.8%;建立的生物素-链霉亲和素ELISA法检测灵敏度为2ng/mL;初步临床应用表明其诊断原发性肝癌敏感度66.7%,特异性91.8%;方法平均批内及批间变异分别为8.9%和11.5%。结论成功建立了生物素-链霉亲和素ELISA检测DSA-GGT方法,方法灵敏度、重复性良好,为临床应用打下基础。

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