重组6B11ScFv/Hsp70融合蛋白的构建、表达及活性测定
【摘要】:正目的构建 pET30a(+)6811ScFv/Hsp70原核表达载体,在大肠杆菌 B121(DE3)中高效表达重组蛋白,并初步测定重组融合蛋白的活性。方法以 PCR 法扩增小鼠热休克蛋白70(Hsp70)基因并在其两端加上 Spel 和 EcoRt 酶切位点,以相同酶切位点插入 pET30a(+)6811ScFv 质粒中构成融合基因 pET30a(+)6811ScFv/Hsp70,转化入 E.coliDH5 α扩增,筛选出阳性克隆,经酶切鉴定和质粒测序,正
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