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复合黏膜上皮的组织工程气管构建

吴明明  崔鹏程  
【摘要】:正目的利用组织工程方法构建含有呼吸道黏膜的人工气管。方法在成功构建气管软骨支架的基础上,用小肠黏膜下层(SIS)及聚乙醇酸(PGA)无纺网作支架,进一步构建含气管黏膜的复合气管支架,并进行动物体内实验研究。首先,制备兔小肠黏膜下层。取兔小肠,机械法去除浆膜层和肌层,剥离内侧黏膜层,高渗盐水去除残留细胞,仅剩黏膜下层的结缔组织,双抗和过氧乙酸分别灭菌,4℃PBS 液中保存备用。其次,取兔关节软骨,用胰酶消化法培养原代软骨细胞用于实验,将细胞种植于 PGA 无纺网上,体外培养一周。同时应用组织块法培养原代兔气管上皮细胞。用机械法分离兔气管黏膜,切割成1 mm2组织块;在35 mm 培养板 (NUNC,丹麦)中放入覆盖有鼠尾胶原薄层的 SIS,将5~6个组织块连同少量 PBS 放置在 SIS 上。待组织块粘附于胶原后,加入步量 DMEM 培养液,DMEM 中含有10%小牛血清、100U/ml 青霉素、

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