构建EGFP-TRAIL融合表达质粒及表达
【摘要】:正目的构建 EGFP-TRAIL 融合表达质粒,并在体外观测其在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞的作用。方法以 EFGP 基因为报告基因,TRAIL 为目的基因,构建 EGFP-TRAIL 融合基因表达质粒,并通过酶切和测序对重组体进行鉴定。经脂质体转染法转染体外培养的胃癌细胞,用荧光显微镜观察 EGFP 的表达,RT-PER 及 Western blot 进一步检测 TRAILmRNA 及其蛋白的表达,MTT 法检测转染后对胃癌细胞的生长抑制率,TUNEL 法观察细胞的凋亡情况,流式细胞仪分析转染后胃癌细胞的凋亡率。结果
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