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小干扰RNA介导的靶Caspase-12对小鼠肝细胞凋亡的阻抑

林兰意  谢青  王晖  姜山  周霞秋  刘芸野  俞红  郭清  金由辛  
【摘要】:正目的:观察针对小鼠半胱天冬氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)基因特异性小干扰RNA(siRNA)构建的表达载体pRNAT-Casp12对Caspase-12基因的抑制及其对内质网应激介导的小鼠肝细胞凋亡的影响。方法:以小鼠肝细胞Hepal-6为靶细胞,利用脂质体与pRNAT-Casp12共转染,分别在转染24、 48和72小时后收集细胞,采用实时荧光定量PCR分析和Western blot检测Caspase-12基因的表达;利用毒胡萝卜素(TG)诱导细胞,建立内质网应激介导的细胞凋亡模型,通过DNA凝胶电泳梯带检测摸

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