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凝血酶对大鼠原代星形胶质细胞水孔蛋白-4表达的影响

孙圣刚  周敬华  
【摘要】:目的:研究不同浓度凝血酶(thrombm,TB)对体外培养大鼠原代星形胶质细胞水孔蛋白-4(aquaponn-4,AQP4) 表达的影响,探讨脑出血后星形胶质细胞水肿机制。方法:新生SD大鼠大脑皮质分离星形胶质细胞,传代培养纯化至98%以上。分别用0.5U/ml,1U/ml,100U/ml,200U/ml浓度的凝血酶对星形胶质细胞处理24h后,采用RT-PCR及免疫组织化学技术检测星形胶质细胞AQP4mRNA和AQP4蛋白表达,TUNEL方法检测细胞凋亡情况,并对星形胶质细胞进行形态学及细胞活性观察。结果:正常星形胶质细胞AQP4mRNA和AQP4蛋白呈微弱表达,高浓度的凝血酶(100U/ml,200U/ml)处理后,AQP4mRNA和AQP4蛋白表达明显升高(P0.01),星形胶质细胞肿胀,TUNEL阳性细胞数显著增多。低浓度的凝血酶 (0.5U/ml,1U/ml)处理后,AQP4mRNA和AQP4蛋白表达出现下调(P0.05),星形胶质细胞形态无明显变化,细胞凋亡数与对照组比较并没有显著增加。结论:高浓度凝血酶能诱导AQP4mRNA及AQP4蛋白高表达,使星形胶质细胞胞体肿胀,细胞活性下降,并发生凋亡。

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