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NGF及8-B-cAMP对脑缺血再灌注大鼠cAMP-PKA信号通路及p75NTR蛋白表达的影响

常丽英  张苏明  李罗清  殷小平  
【摘要】:目的:观察脑室注射神经生长因子(NGF)和8-溴环磷酸腺苷(8-B-cAMP)对脑缺血再灌注大鼠神经再生的影响及其与cAMP-PKA信号途径的关系,并观察NGF对p75NTR蛋白表达的影响。方法:采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,大鼠分为假手术对照组,缺血组(单纯脑缺血再灌注组),NGF1组,NGF2组(脑缺血再灌注并脑室注射NGF,分别注入0.5ug及2.5ug/100g体重)及8-B-cAMP组(脑缺血再灌注并脑室注射8-B-cAMP35μg/100g体重)。用放免法测缺血周边区脑组织cAMP的含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测生长相关蛋白43(GAP-43)及蛋白激酶A (PKA)mRNA的表达,免疫组织化学的方法检测p75NTR蛋白表达。结果:缺血6h皮质cAMP含量较对照组明显下降,24h 略有回升,但与6h比较无显著性差异,6h及24h NGF1组cAMP含量升高接近对照组水平,而NGF2组高于对照组,在两个时间点NGF2组cAMP含量明显高于NGF1组(P0.01)。8-B-cAMP组脑组织cAMP含量也明显增加。脑缺血组6h、 24h,GAP-43及PKA mRNA表达减少,NGF及8-B-cAMP治疗组脑组织GAP-43 mRNA表达较缺血组增加,且这种变化与cAMP的含量及PKA mRNA表达增加相一致,并呈剂量依赖性。正常大脑皮层神经元无p75NTR表达,缺血再灌注6h 有神经元表达,24h表达增加,NGF组p75NTR表达与单纯缺血组无显著性差异。结论:NGF和8-B-cAMP能够促进脑缺血再灌注后的轴突再生,cAMP-PKA信号途径在这个过程中起重要作用,脑室注射NGF对p75NTR表达无显著影响。

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