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稳定转染的hHCN2通道的电生理特点

赵欣  杨向军  李红霞  蒋延波  宋建平  刘志华  蒋文平  
【摘要】:正目的稳定转染hHCN2基因的HEK293细胞的IhHCN2电生理特点。方法全细胞膜片钳技术记录 IhHCN2,保持电位-40mV,测试电压从-50mV逐级超极化至-140mV,阶跃10mV,持续1.5~2s,维持 +20mV,记录IhHCN2的电流轨迹,计算电流密度,以尾电流作图,拟合用Boltzmann公式,求出半最大激活电压 (V1/2),采用Mixed法分析通道激活,双指数曲线法拟合出激活时间常数。保持电位-40mV,预刺激采用- 140mV激活1.5s,测试脉冲由-70mV至+40mV,阶跃10mV,持续0.5s,记录各项离子流的电流轨迹,根据 Goldman-Hodgkin-Katz公式计算钠、钾通透比(PNa/PK)。每一细胞灌流1~2个药物浓度,记录药物灌流前后最大内向电流的变化并分析其浓度依赖性,药物对某一离子流的浓度-效应曲线以Boltzman拟合求半

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