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外周血单个核细胞与外周血干细胞诱导产生树突细胞的比较

朱尊民  张琳  翟亚萍  张茵  
【摘要】:目的寻找一个理想的细胞资源,用于产生树突细胞(DC),为肿瘤的细胞免疫治疗奠定基础。方法从9个健康志愿者的外周血分离出单个核细胞(PBMC),和7个G-CSF动员的健康供者的外周血分离出造血干细胞(PBSC),PBMC和PBSC在同样培养条件下,(37℃RPML1640+10%自体血浆),在培养0天加入相同的生物因子GM-CSF(100ng/ml)、IL-4(1000u/ml)、SCF(20ng/ml)、Flt-31(50ng/ml),在培养14。天加入TNFa(10ng/ml),2天后,在光镜下观察细胞形态,并用台盼蓝染色测定细胞活性,用流式细胞仪测定DC表面的表型,并计算。DC的数目。结果9个PBMC培养接种的PBMC中位数为7D×106(60-80),收获的DC为3.1×106(1.4-3.8),活性细胞百分比为82%(69-92),从最初接种的PBMC诱导产生的DC所占百分比为4.2%(2.3-5.4)。7个PBSC接种培养的细胞数均为80×106,收获的DC数为3.5×106(3.2-5.0),活性细胞百分比为80%(70-86),从最初接种的PBSC诱导的DC所占百分比为4%(4.0-6.3)。并观察了PBMC在加入Lysls对产生DC的影响,加入Lysis组DC产量为2.6×106,未加组LysisDC产量为2.1×106,其细胞活力分别为78%和68%。结论从PBMC和PBSC皆可培养出DC,在培养条件相同下诱导产生的DC量无明显差别,而Lysis加入与否对诱导产生DC量及活力有一定影响。

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