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缺血预处理对急性冬眠心肌环氧化酶-2及细胞凋亡的影响

林利  夏勇  杨煜  陈清枝  
【摘要】:目的使用闭胸法建立冬眠心肌的动物模型。观察冬眠心肌的病理及超微结构的改变,并以其超微结构改变作为标准:(1)探讨冬眠心肌组织中细胞凋亡的发生情况。(2)探讨冬眠心肌中COX-2、Bcl-2、Bax的变化和意义。(3)探讨缺血预处理对COX-2、Bcl-2、Bax表达的影响及其对心肌细胞凋亡的影响。方法(1)18只小型中国家猪,随机分为3组:对照组(CON,n=6);冬眠心肌组(HM组,n=6);缺血预处理组(IP组,n=6)于模型制备前应用球囊法行两个循环各5min的缺血/再灌注处理;HM组和IP组以左冠状动脉前降支为靶血管,经股动脉送入球囊造成冠状动脉即刻狭窄80%-90%后持续120min,制备成冬眠心肌模型;CON组以相同方法行冠状动脉造影术但无狭窄。(2)处死动物后分别取正常心肌、冬眠心肌两种心肌标本进行光镜、电镜检查以观察大体形态及超微结构。(3)采用免疫组化方法检测三组心肌组织中COX-2、Bcl-2、Bax表达情况。(4)TUNEL检测冬眠心肌组织中细胞凋亡。结果(1)冬眠心肌心内膜至心外膜全层未见心肌细胞坏死的病理改变,仅有细胞肿胀、核肿胀等非特异性改变,IP组与HM组相比心肌细胞水肿及核水肿等改变有所减轻。(2)电镜结果冬眠心肌表现为肌丝稀疏,糖原聚集,线粒体小而密,核周空泡大,肌浆网扩张。(3)免疫组化结果冬眠心肌组中COX-2、Bcl-2、Bax表达的阳性率高于CON组,在IP组的冬眠心肌中,Cox-2表达的阳性率下降,但仍高于CON;Bcl-2却较HM组进一步升高,Bax表达的阳性率在IP组与HM组相比无明显差别。(4)TUNEL结果CON组中细胞凋亡极少,HM组中细胞凋亡较多,IP组中细胞凋亡明显减少但仍高于CON组。结论(1)冬眠心肌中存在心肌细胞凋亡,Bcl-2对冬眠心肌细胞凋亡有重要的调控作用,缺血预处理后Bcl-2表达增多有利于心肌细胞存活。(2)缺血诱导的冬眠心肌细胞凋亡可能与COX-2表达及其启动相关基因有关。(3)缺血预处理可能通过适度抑制COX-2来减少心肌细胞凋亡的发生。

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