缝隙连接阻断剂16-DSA对SD大鼠心脏的影响
【摘要】：目的研究缝隙连接阻断剂16-DSA(16Doxyl Stearic Acid)对离体心脏在血流动力学及电生理学方面的作用,及在心肌局部缺血状态下,对室性心律失常发生率的影响,以进一步探讨缝隙连接在室性心律失常方面的作用机制。方法利用Langendorff灌流装置在离体心脏水平观察16-DSA(浓度:0.5mM)的作用,观测指标:Lvsp(左室峰压),Lvdp(左室舒张末压),dp/dtmax(左室压力最大上升速率),MAPD90(动作电位时程),HR(心率),PR间期。QT间期,在根部结扎左冠状动脉前降支,30分钟后复流,造成再灌注室性心律失常模型,进行心律失常评分。观察16-DSA对于该评分的影响。取缺血部分心肌标本,进行免疫组化染色,一抗为抗缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)的抗体。在蛋白水平上观察对照组和处理组之间连接蛋白的变化。取缺血部分心肌标本做RT-PCR半定量检测,在RNA水平上观察对照组和处理组之间连接蛋白的差别。结果与对照组相比,给药组可见有LVSP和dp/dtmax下降,MAPD90及QT间期延长的趋势,但无统计学意义。可使LVEDP上升,心率下降及PR间期延长或出现房室传导阻滞(P0.05)。与缺血对照组相比,处理组可使心律失常评分下降,P0.01。免疫组化可见,缺血组与正常组相比其Cx43的分布面积、计数,及二者比值均下降(P0.01)。16-DSA可使以上各指标上升,P0.05。经RT-PCR半定量试验可见,CX43的RNA水平与其蛋白表达趋势基本相同。缺血组与正常组相比其CX43的条带辉度值有明显下降(P0.05),而16-DSA组的辉度值与缺血组比较有上升趋势,有统计学意义(P0.05)。结论在一定浓度范围内,16-DSA可以使正常心肌的舒张功能下降,房室传导减慢或发生阻滞,也会对窦房结有一定影响。一定浓度的16-DSA可以使室性心律失常的发生率下降,而这种作用可能与其对缝隙连接的功能阻断和诱使其基因的转录增加,进而促进其合成增加的综合作用有关。
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