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胡大海朱雄翔徐明达董茂龙丁国斌唐建兵陈璧崔大祥  
【摘要】:正SMADs是新近发现的参与TCF-β超家族的细胞内信号转导的一族蛋白,现已发现的包括Smad1,2,……9等共九个成员,其中Smad2,3为限于转导TGF-β和活化素类通路信号的特异SMAD.本研究旨在应用反义核酸技术,观察Smad2,3的反义ODN对TGF-β刺激烧伤后增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的生物学作用,探讨防治烧伤后增生性瘢痕的新途径.材料与方法Smad2和Smad3反义ODN的合成采用DNA合成仪,合成的Smad2和Smad3反义ODN序列为:5’TACTCAGAGAAATGTTCA 3’和5’TACAGCAGGTAGGAC 3’.采用亚磷酸胺DNA合成法,在固相硅胶上按3’→5’方向合成,并进行硫代修饰.烧伤后增生性瘢痕成纤维细胞的分离与培养 取烧伤后增生性瘢痕切除组织,切至3mm×3mm大小,用10%FCS DMEN浸润贴附于培养瓶,翻转培养瓶悬空式培养组织块4h,再正置培养瓶,加入足量的10%FCS DMEM培养至成纤维细胞由组织块游出并长满瓶养瓶底,0.125%胰酶消化并收集成纤维细胞,传代扩大培养,取2-3代细胞用于实验.


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