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布鲁氏菌病新型疫苗的初步研究

王希良  罗德炎  曾政  周丽丽  张松乐  
【摘要】:目的研制布鲁氏菌病新型疫苗,为安全、有效的防治布鲁氏菌病提供保证。方法采用基因重组技术扩增牛、羊、猪布氏菌保护性抗原BCSP_(31)、BLS、OMP_(16)、P_(39)和L_7/L_(12)基因片段,及BCSP_(31)-L_7/L_(12)、BLS-L_7/L_(12)、OMP_(16)-L_7/L_(12)和BCSP_(39)-L_7/L_(12)融合基因片段,克隆于原核表达载体pQE_(30)上,在IPTG作用下诱导重组蛋白的表达,用层析拄纯化BCSP_(31)、BLS、OMP_(16)、P_(39)和L_7/L_(12)及BCSP_(31)-L7/L_(12)、BLS-L_7/L_(12)、OMP_(16)-L_7/LL_(12)和BCSP_(39)-L_7/L_(12)重组蛋白抗原;扩增布氏菌保护性抗原BCSP_(31)、BLS、OMP_(16)、P_(39)和L_7/L_(12)基因片段,及BCSP_(31)-L_7/L_(12)、BLS-L_7/L_(12)、OMP_(16)-L_7/L_(12)和BCSP_(39)-L_7/L_(12)融合基因片段,克隆于真核表达载体pcDNA_3上,转染Hela细胞,在G_(418)的作用于下诱导外原蛋白的表达,经狭缝杂交证实BCSP_(31)、BLS、OMP_(16)、P_(39)和L_7/L_(12)基因片段,及BCSP_(31)-L_7/L_(12)、BLS-L_7/L_(12)、OMP_(16)-L_7/L_(12)和BCSP_(39)-L_7/L_(12)蛋白抗原的表达;制备布氏菌病BCSP_(31)/pcDN_(A3)、BLS/pcDNA_3、OMP_(16)/pcDNA_3、P_(39)/pcDNA_3和/pcDNA_3L_7/L_(12)基因片段,及BCSP_(31)-L_7/L_(12)/pcDNA_3、BLS-L_7/L_(12)/pcDNA_3、OMP_(16)-L_7/L_(12)/pcDNA双价基因疫苗,及BCSP_(31)、BLS、OMP_(16)、P_(39)和L_7/L_(12)及BCSP_(31)-L_7/L_(12)、BLS-L_7/L_(12)、OMP_(16)-L_7L_(12)和BCSP_(39)-L_7/L_(12)单价、双价基因重组蛋白疫苗,分别免疫Balb/c鼠三次,及重组蛋白疫苗、基因疫苗联合免疫,再分别用牛、羊和猪布鲁氏菌毒株攻击观察免疫保护效果。结果构建的布鲁氏菌重要保护性抗原基因重组质粒测序结果与设计的序列完全一致;获得了在原核细胞和真核细胞中表达的BCSP_(31)、BLS、OMP_(16)、P_(39)和L_7/L_(12)及BCSP_(31)-L_7/L_(12)、BLS-L_7/L_(12)、OMP_(16)-L_7/L_(12)和BCSP_(39)-L_7/L_(12)重组蛋白,及具有免疫学活性的BCSP_(31)、BLS、OMP_(16)、P_(39)和L_7/L_(12)及BCSP_(31)-L_7/_(12)、BLS-L_7/_(12)、OMP_(16)-L_7/_(12)和BCSP_(39)-L_7/_(12)纯化重组蛋白抗原;加入佐剂制备了布鲁氏菌病新型疫苗(重组蛋白疫苗和基因疫苗);布氏菌病新型疫苗分别免疫Balb/c鼠,均产生了有效的特异性的免疫应答效果,其中双价疫苗效果好于单价、基因疫苗效果好于重组蛋白疫苗、BLS-L_7/_(12)疫苗效果好于OMP_(16)-L_7/_(12)、BCSP_(39)-L_7/_(12)、BCSP_(31)-L_7/_(12)疫苗;用2×10~8CFU布鲁氏菌野生株攻毒,不同类型的布鲁氏菌病新型疫苗都有一定的保护效果,其中,BLS-L_7/_(12)基因疫苗免疫保护效果好于OMP_(16)-L_7/_(12)、BCSP_(39)-L_7/_(12)、BC-SP_(31)-L_7/_(12)基因疫苗,而蛋白疫苗的保护效果不完全,基因疫苗和重组蛋白疫苗联合免疫有增强布鲁氏菌病新型疫苗的免疫保护效果。结论研制筛选获得的布氏菌病新型疫苗初步证实具有良好细胞免疫和体液免疫的免疫应答及免疫保护效果的效果,深入研究正在进行之中,有望为布氏菌病的有效防治提供保证。

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1 记者  薛婧;哈兽研禽流感新型疫苗投产[N];黑龙江日报;2006年
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4 记者 张咏晴;抗病毒新型疫苗问世[N];文汇报;2000年
5 李杰;新型疫苗正在研制[N];科技日报;2009年
6 刘垠;转型中的疫苗研发考验“中国功夫”[N];大众科技报;2008年
7 陈磊;我国正由疫苗生产使用大国走向研发强国[N];科技日报;2008年
8 夏金彪;疫苗市场成为医药行业新的增长热点[N];中国经济时报;2006年
9 桦文;新型疫苗有效预防子宫颈癌[N];医药经济报;2002年
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