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双酚A对植入后大鼠、小鼠胚胎致畸性的体外实验研究

李勇  裴新荣  龙鼎新  
【摘要】:采用植入后全胚胎培养模型,将8.5日龄BalB/C小鼠胚胎和9.5日龄Wistar大鼠胚胎与含双酚A(终浓度为:20,40,60,80,100mg/L)的大鼠即刻离心血清共培养48小时后,收获胚胎。采用李勇的大鼠胚胎组织器官评分和Van的小鼠胚胎发育评分法分别对所收获胚胎进行评分,观察双酚A(BPA)对其生长发育和组织器官形态分化的影响及其畸形状况;并将部分卵黄囊固定后进行光镜和电镜观察。结果显示:随着BPA染毒剂量的增加胚胎在体外的生长发育受影响越严重,呈现出明显的剂量-效应及剂量-反应关系,对两种鼠的最大无作用剂量均为40mg/L。60mg/L以上组可诱发卵黄囊生长和血管分化不良、生长迟缓及形态分化异常,严重者出现体位异常(如Ⅰ形体位、腹突等)、神经系统异常(如脑积水、小头、神经管未闭等)、心脏发育异常(如心包积液、发育迟缓等)、鳃弓发育异常以及小眼、小肢芽等畸形。光镜和电镜结果显示过量的BPA可导致VYS结构的改变,内皮层细胞的变性、坏死、缺失和微绒毛脱落、减少,使得其内吞、消化等功能受到影响;间质层微血管、血岛、红细胞数量减少或无反映了血管分化不良,造血功能降低,使得胚胎生长发育所需的氧和营养物质得不到供应,造成胚胎缺氧和新陈代谢紊乱,从而导致胚胎发育异常。透射电镜下可见100mg/L的BPA染毒48小时后内皮细胞微绒毛短而少,排列紊乱,有的胞浆及核内出现空泡,胞浆顶端溶酶体电子密度不均、数量下降,有的溶酶体吞噬线粒体等细胞器结构,线粒体明显肿胀,瘠拥挤变形或断裂,严重者瘠减少或呈空泡状改变;内质网、高尔基体等细胞器不丰富。间质层未见血管,偶见单个红细胞,间皮层细胞也出现坏死现象,表现为细胞膜崩解、细胞器消失、核电子密度下降。结果提示:在较高剂量下,BPA对体外培养的大鼠和小鼠胚胎具有一定的致畸性,可诱导畸形形成,其中对卵黄囊胎盘的结构和功能的影响可能是其致畸作用的机制之一。

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