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白细胞蛋白酶抑制因子促进真皮间充质干细胞增殖机制的实验研究

江德鹏  粟永萍  屈纪富  冉新泽  程天民  向静  文亮  
【摘要】:目的:研究白细胞蛋白酶抑制因子(Secretory leukocyte protease inhibitor SLPI)对真皮间充质干细胞(dermal Mesenchymal Stem Cells dMSCs)的增殖作用及其机制。方法:利用贴壁生长的特性分离 dMSCs,,细胞在无血清IMDM培养液中培养48小时后,加入不同浓度的SLPI因子,24小时后加入 [H3]Thymidine,通过液闪计数器计数。提取对照组和SLPI刺激后细胞的总RNA和蛋白,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SLPI因子刺激前后cyclinA,cdk2,cdk4的变化,Western blot检测SLPI因子刺激前后cyclinD1,cyclinE的表达变化。结果:分离的大鼠dMSCs呈梭形,在体外显示多向分化潜能。加入 SLPI因子后,[H3]Thymidine掺入活性增强。.RT-PCR提示在SLPI诱导下,cdk2表达增强,而cyclinA和 cdk4表达没有明显变化,Western blot提示SLPI因子刺激后cyclinDl.cyclinE表达均明显增强。结论:SLPI 能够促进dMSCs的增殖,其机制可能是通过调节cyclinDl,cyclinE,cdk2等细胞周期素的表达。

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