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HCV的C/E1区PCR扩增方法的改进

周素娟  张铁军  何纳  
【摘要】:目的通过对丙型肝炎病毒(HCV)基因组变异度较大的C/E1区兼并性引物的修改以提高该基因片段的扩增成功率,同时也为突变发生频繁的RNA病毒的核酸扩增提供方法上的借鉴。方法选用文献中针对C/E1区的多点兼并性引物("原引物")进行PCR扩增、测序,根据序列比对结果对原引物进行修改,没有突变的点进行去兼并还原,新突变点重新兼并,最终设计出特异性高适用性好的新引物。结果以44例HCV核酸阳性的艾滋病病毒(HIV)感染者为研究样本,原引物仅能成功扩增23例(52.3%),而改进后的新引物能成功而高效的扩增40例(90.9%)。结论新引物能显著提高HCV核酸的检出率和扩增效率,为HCV的基因分型提供新的检测策略。

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