SEA和B7-1基因真核共表达载体的构建及在B16细胞的表达

【摘要】：目的构建SEA和小鼠B7-1基因真核共表达载体,观察其在小鼠黑色素瘤细胞系B16细胞膜上的表达情况。方法采用RT-PCR方法从小鼠脾脏克隆了小鼠B7-1基因,构建至pIRES2-EGFP载体上;用已构建的重组逆转录病毒载体pLXSN-SEP为模板,采用PCR方法,对SEA-B7tm基因进行了亚克隆;最后将小鼠B7-1、内部核糖体进入位点、SEA-B7tm基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1+上。利用阳离子脂质体将重组质粒转染B16细胞,间接免疫荧光法检测B7-1和SEA分子在B16细胞膜表面的表达情况。结果重组质粒经KpnI和XbaI酶切后,电泳显示约1.1kb、1.4kb和5.4kb三个片段;测序结果与Genebank中公布的SEA-B7tm基因、小鼠B7-1cDNA序列相符,双标记间接免疫荧光检测结果表明B7-1、SEA同时在转染重组质粒的B16细胞膜上表达。结论成功构建了SEA和小鼠B7-1真核共表达载体,使两种分子同时能够表达在肿瘤细胞膜表面,为进一步研究SEA和B7-1联合应用抗肿瘤免疫治疗及其免疫机理奠定了基础。

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前20条

1	刘兴晖;祝成亮;宋惠;王艳;李毅;;载脂蛋白M基因真核表达载体构建及其对HBV复制的影响[J];基础医学与临床;2011年08期
2	李彩艳;王凡;王崎;;pcDNA3.1(+)gpc-5真核表达载体的构建及鉴定[J];包头医学院学报;2011年03期
3	张小华;刘向勇;王跃嗣;牛新华;;人酸性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及鉴定[J];滨州医学院学报;2011年03期
4	熊伟;陈贵元;何敏;左绍远;;人细胞周期蛋白cyclin E基因的克隆与真核表达载体的构建[J];大理学院学报;2011年06期
5	林月霞;吴志坚;袁茵;董斌;田素娟;;人乙酰肝素酶基因真核表达载体的构建与表达[J];广东药学院学报;2011年04期
6	孙大康;安新业;胡凤爱;李彩玉;郑静;;Trim6真核表达载体的构建及表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年09期
7	李兴兰;余章斌;韩树萍;陈玉林;顾筱琪;孙青;郭锡熔;;叶酸结合蛋白1真核表达载体的构建及鉴定[J];实用儿科临床杂志;2011年14期
8	周熙惠;惠智艳;史瑞明;宋红霞;张葳;刘俐;;新生儿惊厥相关基因KCNQ2定点突变及其蛋白表达的研究[J];中国当代儿科杂志;2011年08期
9	郭凯文;邱文洪;许楚娟;易路阳;;人Gal-9基因的克隆及在CHO细胞中的表达[J];中国免疫学杂志;2011年09期
10	李明辉;徐静;蒋茜;;RNAi真核表达载体上报告基因的构建及其在人结肠癌HCT-8细胞中的表达[J];吉林医学;2011年22期
11	李栋;聂代邦;王海军;段新平;逄大欣;欧阳红生;;Fat-1基因真核表达载体的构建及其对人口腔鳞癌细胞脂肪酸含量的影响[J];现代生物医学进展;2011年11期
12	吴健谊;蒋太峰;谢剑君;张锴;杜则澎;许丽艳;;哺乳动物细胞CDK2系列表达载体的构建与表达[J];癌变·畸变·突变;2011年04期
13	李田兰;赵春亭;张忠广;刘竹珍;刘世海;孟冬梅;张元峰;;人同源盒基因HoxB4真核表达载体的构建及鉴定[J];中国实验血液学杂志;2011年03期
14	孙宇;罗佳;马玉媛;章金刚;;猪APOBEC3F基因克隆及真核表达载体的构建与鉴定[J];第三军医大学学报;2011年18期
15	谢三平;陈吉相;李慧;徐婧;黄园园;;携带人类GAD_(67)基因真核表达载体的构建及转染骨髓基质细胞[J];神经损伤与功能重建;2011年04期
16	常婷;林宏;刘煜;李柱一;;人AChR-Fc融合蛋白真核表达载体的构建和表达[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2011年04期
17	凌永赤;方天敏;刘宁;赵荫农;;GPC3真核表达载体的构建及其对肝癌细胞功能的影响[J];广西医科大学学报;2011年03期
18	徐红美;许文林;姚俊;冷加燕;吴晓君;陈巧云;;Hsa-mir-216a真核表达载体的构建及其在胃癌细胞SGC7901/DDP中的表达[J];江苏大学学报(医学版);2011年04期
19	张瑞涛;史惠蓉;陈志敏;黄好亮;刘惠娜;;MACC1基因shRNA真核表达载体的构建及其在OVCAR-3细胞中的表达[J];实用医学杂志;2011年14期
20	李丙蓉;郑丹;邓华聪;刘金波;兰丽珍;郑宏庭;;人脂联素、球状脂联蛋白基因克隆及真核表达载体的构建与表达[J];中国糖尿病杂志;2007年06期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	司少艳;隋延仿;李增山;宋宏萍;黄亚渝;叶菁;陈广生;张秀敏;;SEA和B7-1基因真核共表达载体的构建及在B16细胞的表达[A];中华医学会病理学分会2005年学术年会论文汇编[C];2005年
2	尹郸丹;梁英民;韩骅;侯丽宏;王耀春;胡兴斌;张萍;康志杰;时宏伟;;RBP-J与KyoT2真核表达载体的构建与鉴定[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
3	郭鹏;闫承慧;郭亮;康建;韩雅玲;;小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建及鉴定[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
4	杨英;刘树铮;;pNEgr-mIL-12真核表达载体的构建及其在体外和体内生物学活性的检测[A];中华医学会放射医学与防护学分会第三次全国中青年学术交流会论文汇编[C];2001年
5	王郡甫;许晓群;张彩;张建华;高春义;;人白细胞介素21真核表达载体的构建及其在NK92细胞中的表达[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
6	郭鹏;闫承慧;郭亮;康建;韩雅玲;;小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建及鉴定[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年
7	蔺丽慧;崔玉宝;李莉;;Fcγ-Der f2载体构建及融合蛋白表达[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
8	彭旭;谭江琳;袁顺宗;马兵;贺伟峰;黄正根;程文广;王晓娟;甘成军;胡婕;杨世伟;杨俊杰;陈希炜;胡晓红;张小容;罗高兴;吴军;;HT036是纤维化相关基因P311的相互作用蛋白[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
9	高蕾;陈幸华;张曦;彭贤贵;孔佩艳;刘林;刘红;张怡;刘耀;;VCAM-1基因的克隆及VCAM-1-pcDNA3．1(+)真核表达载体的构建[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年
10	胡敬海;王春喜;;抑癌基因TIP30真核表达载体的构建[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	郭凯文;ASAP3对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响[D];华中科技大学;2011年
2	廖婵;抗人CD45亚类新单抗ZCH-6-3A4识别抗原表位的研究[D];浙江大学;2011年
3	孙宇辉;人Ang-2基因真核表达载体的构建及对宫颈癌肿瘤血管形成的影响[D];吉林大学;2004年
4	李和伟;人胰腺癌基因治疗的实验性研究[D];中国协和医科大学;1995年
5	范志强;蚓激酶基因在山羊乳腺中的表达及转基因小鼠的制备[D];中国医科大学;2005年
6	李健;miR-155真核表达载体的构建及其在胰腺癌中功能的初步研究[D];中国协和医科大学;2008年
7	危少华;人重组IL-24基因治疗乳腺癌的实验研究[D];苏州大学;2005年
8	张丽君;bFGF基因转染成骨细胞的生物学性质及成骨研究[D];华南理工大学;2003年
9	许贞书;人血液血管细胞生成素对骨髓基质细胞生物学作用的实验研究[D];福建医科大学;2005年
10	程绍辉;免疫分子的锚定修饰及其抑瘤效果的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	宋晖;KAI1基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞侵袭抑制作用的体外研究[D];第四军医大学;2004年
2	左国伟;人乳头瘤病毒11型E6基因的克隆、真核表达及其功能的初步研究[D];重庆医科大学;2005年
3	涂亦娴;猪瘟病毒E2基因的克隆及其DNA疫苗免疫效果的研究[D];新疆大学;2005年
4	周丹;猪细小病毒SC1株VP2基因表达载体的构建及其表达的研究[D];四川农业大学;2005年
5	李一冬;hTERT真核表达载体的构建与表达[D];郑州大学;2005年
6	李强;重症肌无力抗乙酰胆碱受体单链抗体A7基因真核表达载体的构建[D];延边大学;2006年
7	王青;新城疫病毒F基因在真核及原核表达系统中的表达[D];西北农林科技大学;2007年
8	许子志;乳腺癌细胞Id1 miRNA真核表达载体构建转染及对MMP9的影响[D];福建医科大学;2009年
9	张惠菊;人自身抗原U1RNP-70K的酵母重组表达及其抗体检测斑点免疫金渗滤法的建立[D];福建医科大学;2009年
10	卢春生;人骨形成蛋白2和7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建[D];广州医学院;2009年

中国重要报纸全文数据库

前10条

1	;1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达[N];中国医药报;2003年
2	张中桥;反义Cortactin基因能抑制肝癌细胞转移[N];中国医药报;2006年
3	张中桥;Survivin是脑胶质瘤基因治疗的良好靶点[N];中国医药报;2006年
4	吴一福;首次成功分离出HPA全长编码基因[N];中国医药报;2005年
5	吴一福;四军医大成功建立HCV多表位基因P815细胞系[N];中国医药报;2006年
6	张中桥;西京医院建立稳定表达MAGE-n细胞系[N];中国医药报;2006年
7	张中桥;胃癌免疫治疗研究有新进展[N];中国医药报;2002年
8	万同己;乙肝的基因治疗[N];中国医药报;2004年
9	张中桥;可诱导性真核表达载体构建成功[N];中国医药报;2004年
10	吴一福;四军医大首次构建成永生化胚胎肝细胞系[N];中国医药报;2006年

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