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丹参酮ⅡA通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬抗内皮细胞氧化应激损伤

曹慧敏  宋囡  张妮  杨关林  陈文娜  张哲  贾连群  
【摘要】:目的:基于PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路探讨丹参酮ⅡA对ox-LDL诱导内皮细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。方法:体外培养EA.hy926细胞,随机分为正常组、模型组、ox-LDL+丹参酮ⅡA组、ox-LDL+丹参酮ⅡA+LY294002组、丹参酮ⅡA组、LY294002组。用比色法检测细胞氧化应激损伤MDA含量及SOD活力,利用FITC-LC3荧光显微镜及Naolive 3D cell explorer实时无标记3D显微成像系统检测自噬发生,同时应用免疫印迹(Western Blotting)检测自噬相关蛋白以及PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达情况。结果:与正常组相比,模型组MDA含量增高,SOD活力降低,LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白含量增多(P0.01);丹参酮ⅡA干预后细胞中MDA含量降低,SOD活力增高,LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白含量增多(P0.01)。与正常组相比,模型组PI3K、P-Akt、P-mTOR、蛋白表达水平明显减少(O0.05或P0.01);与模型组相比,丹参酮ⅡA干预后细胞中PI3K、P-Akt、P-mTOR蛋白表达水平明显减少(P0.05或P0.01);与ox-LDL+丹参酮ⅡA组相比,加入PI3K的抑制剂LY294002后细胞中的LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白含量减少,自噬水平减少(P0.01)。结论:丹参酮ⅡA可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路促进自噬,对ox-LDL诱导的EA.Hy926细胞氧化应激损伤起到保护作用,进而防治动脉粥样硬化。

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