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漆黄素调节PI3K/Akt/mTOR通路诱导乳腺癌细胞凋亡的体内体外研究

孙旭  于明薇  马雪曼  张甘霖  杨永  曹可心  孙佳琪  杨国旺  王笑民  
【摘要】:目的漆黄素可抑制多种肿瘤细胞的增殖,诱导肿瘤细胞的凋亡,但是漆黄素对乳腺癌细胞的作用罕见报道,本研究通过体内体外实验探讨漆黄素对乳腺癌细胞的增殖和凋亡的影响,以及可能的作用机制。方法采用MTT方法检测漆黄素20μM,40μM,80μM对乳腺癌细胞4T1,MCF-7,MDA-MB-231,增殖的影响;采用Ecis方法检测漆黄素对4T1增殖的影响,应用基于ECIS的电击损伤修复和侵袭方法研究漆黄素对4T1的转移和侵袭的影响;通过Annexin V-PI双染方法检测漆黄素对4T1凋亡的影响;观察漆黄素对4T1荷瘤小鼠原位移植瘤的体积、瘤重、肿瘤光子数的影响;通过原位细胞凋亡Tunel法检测4T1荷瘤小鼠原位移植瘤凋亡的影响;采用Westen检测4T1细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白表达,采用Westen检测4T1荷瘤小鼠原位移植瘤凋亡因子的表达。结果漆黄素可以抑制MCF-7,MDA-MB-23,4T1细胞的增殖(P0.05);ECIS实验显示漆黄素可以抑制4T1的增殖、转移和侵袭;漆黄素干预4T1细胞24h后,流式细胞检测发现中高浓度漆黄素可以诱导4T1的凋亡(P0.05),中浓度漆黄素主要诱导细胞的早期凋亡,高浓度的漆黄素主要诱导细胞的晚期凋亡;体内实验结果显示,与模型组相比,漆黄素可以降低4T1原位移植瘤的肿瘤体积(P0.05)和肿瘤光子数(P0.05),减少瘤重(P0.05),漆黄素组的凋亡肿瘤细胞增加(P0.05);Western结果显示漆黄素可以降低PI3K、Akt、mTOR和P70的磷酸化,上调Bax,Caspae 3,Caspae 8,Caspase 9等凋亡因子。结论漆黄素可以抑制乳腺癌的增殖,诱导乳腺癌细胞的凋亡,作用机制和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关。

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