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微应变环境下柚皮苷单体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

赵斌  马信龙  孙晓雷  李秀兰  杜育任  马剑雄  张扬  李爽  
【摘要】:目的探讨在微应变环境下,中药骨碎补萃取物-柚皮苷单体对体外培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的影响及机制。方法将体外培养的兔MSCs接种于硅橡胶膜上,利用EF3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应舱系统,对细胞进行周期性循环牵张微应变加载。实验分为A组:常规培养环境的空白对照组;B组:单纯5万微应变加载组;C组:单纯含柚皮苷的培养组,柚皮苷浓度分别为2ng/ml、20ng/ml和200ng/ml;D组:5万微应变环境下,联合应用含柚皮苷浓度为2ng/ml、20ng/ml和200ng/ml的培养组。应用流式细胞仪检测微应变加载后各组MSCs的增殖活性。RT-PCR检测各组细胞CON、Runx2及ColⅠ的基因表达。结果 5万微应变环境下联合柚皮苷培养的MSCs呈现明显的极性排列趋向,且细胞长轴平行力学刺激方向。柚皮苷与微应变刺激联合作用下,能够显著的提高MSCs的增殖活性;5万微应变刺激下200ng/ml的柚皮苷提高OCN基因表达,5万微应变刺激下不同浓度的柚皮苷均明显增强了Runx2基因的表达,且与柚皮苷浓度成正效应;微应变刺激下低浓度柚皮苷促进ColⅠ基因表达,而微应变刺激下高浓度柚皮苷,却抑制了ColⅠ基因的表达。结论微应变环境与柚皮苷单体联合作用,增强了MSCs的增殖活性并能够促进其向成骨分化。

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