柚皮苷中药微环境下牵张应力对大鼠成骨细胞增值与分化的影响

【摘要】：目的探讨在柚皮苷单体(Naringin)中药微环境下,不同牵张应力对大鼠成骨细胞增值与分化的影响及其机制。方法在柚皮苷浓度为20ug/ml的培养基培养环境下,以硅橡胶膜为细胞应力加载载体,利用EF3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应舱对成骨细胞加载循环牵张应力,分组如下:A组:中药柚皮苷浓度为20ug/ml培养基环境下,分别与2万微应变、4万微应变和8万微应变的力学加载联合作用24h;B组:单纯2万微应变、4万微应变和8万微应变的力学加载24h;C组:单纯中药柚皮苷浓度为20ug/ml培养基培养成骨细胞24h;D组:空白对照组,常规培养环境下培养成骨细胞。流式细胞仪检测各组细胞周期的变化,同时RT-PCR检测OCN(骨钙蛋白)、Ⅰ型胶原及Runx2的mRNA表达。结果柚皮苷中药微环境下,A组成骨细胞的增殖于2万微应变加载时明显高于B组同等加载组;力学加载为2万及4万微应变时,A组成骨细胞特异性基因OCN(骨钙蛋白)、Ⅰ型胶原及Runx2的mRNA的表达明显高于无中药环境的B组(p0.05);同时A组与B组的以上三种特异基因表达也明显高于单纯中药环境组和空白对照组。结论在柚皮苷中药微环境下,较小的牵张应力加载对成骨细胞的增殖有明显的促进作用,同时也对成骨细胞的分化具有明显的促进作用,力学微环境与中药微环境对成骨细胞的增殖与分化有着可能的协同效应。